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Les avantages et inconvénients du microscope optique se réfèrent à la lumière, au grossissement et à la résolution. Les microscopes optiques amplifient la lumière visible - un avantage évident, car c'est ce que nos yeux peuvent voir. Cependant, le grossissement (la taille d'un objet apparaît) et la résolution (clarté des détails) sont limités lors de l'utilisation de microscopes optiques.
Source de lumière
Les microscopes optiques utilisent un miroir réfléchissant ou une lumière électrique pour un éclairage direct à travers l'échantillon et dans le système de lentilles. Les systèmes de miroirs sont moins chers, mais nécessitent un éclairage ambiant adéquat et plus de patience pour s'ajuster. Les systèmes d'éclairage électrique sont plus chers et nécessitent une prise à proximité, mais sont plus simples à utiliser.
Intensité lumineuse
L'intensité lumineuse (luminosité) est importante, car la lumière traverse l'échantillon que vous regardez. Un échantillon mince et translucide (clair) est mieux vu avec une lumière de faible intensité, tandis que les échantillons plus épais et opaques nécessitent une lumière plus intense. Un inconvénient de la microscopie optique est que certains échantillons sont trop épais ou opaques pour être vus sous ce type de microscope. Des échantillons très fins ou translucides peuvent être colorés afin d'augmenter le contraste pour une meilleure visualisation. Cependant, ce processus tuera les spécimens vivants.
Réglage de l'intensité lumineuse
Le diaphragme, situé au-dessus de la source lumineuse et en dessous de la platine (plate-forme d'échantillonnage), ajuste la quantité de lumière qui traverse l'échantillon. Deux types de diaphragmes sont disponibles: un sélecteur d'ouverture fixe et une ouverture ajustable de type appareil photo.
L'ouverture fixe se compose de plusieurs tailles différentes d'ouvertures sur une plaque tournante. L'ouverture souhaitée est sélectionnée en tournant la molette. Les diaphragmes à ouverture fixe sont moins chers, mais offrent un contrôle moins précis de l'intensité lumineuse.
Le diaphragme à ouverture réglable fournit une taille d'ouverture variable en continu, tout comme le f-stop sur un objectif d'appareil photo, et offre ainsi un contrôle plus précis de l'intensité lumineuse. Ces systèmes sont plus chers.
Élargissement
Le plus gros n'est pas toujours le meilleur. Les microscopes optiques peuvent très bien agrandir des objets jusqu'à 1000x (mille fois plus grands que nature). De plus, l'image devient de plus en plus déformée et floue. L'augmentation de la taille ne fait pas une meilleure image, et rend en fait l'image inutilisable.
En utilisant un grossissement jusqu'à 1000x, tous les types d'organismes vivants peuvent être vus, même les plus petites cellules bactériennes. Cela fait de la microscopie optique un outil puissant pour étudier les types de cellules, l'eau des étangs, les échantillons de sol et d'autres études, où une vue d'ensemble des micro-organismes est souhaitée. La microscopie optique, cependant, est peu utile pour l'étude des structures subcellulaires, en raison des limites de résolution inhérentes à l'utilisation de la lumière.
Résolution
La résolution est une mesure de la clarté d'un bon détail produit dans une image. Les images à basse résolution apparaissent floues ou «floues». Les images haute résolution sont nettes, claires et détaillées. Le plus gros inconvénient des microscopes optiques est la limite de résolution. En plus du grossissement de 1000x, les microscopes optiques perdent rapidement la capacité de peaufiner les petits détails. Cela résulte des propriétés physiques de la lumière et non de la qualité de l'instrument. Pour une meilleure résolution des détails des structures subcellulaires, d'autres technologies, telles que les microscopes électroniques, doivent être utilisées.
